Захворювання, що передаються статевим шляхом, мають інфекційну природу і досить небезпечні для здоров’я. Хламідіоз є одним з часто зустрічаються з них, може довгий час протікати безсимптомно, завдаючи шкоди організму. Тому лікарю складно визначити наявність хвороботворних мікроорганізмів Chlamydia trachomatis у пацієнта при візуальному огляді без спеціальних діагностичних заходів. Метод ПЛР на хламідії визнаний одним з найбільш чутливий в діагностиці хламідіозу.
ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) дозволяє визначити хламідіоз навіть при прихованому перебігу.
Показання для ПЛР
Основа роботи полімеразної ланцюгової реакції – це багаторазове дублювання фрагментів ланцюжки ДНК, що відповідають заданим вимогам. ДНК береться з біоматеріалу пацієнтів: слини, сечі чи крові. В ході роботи на виділений біоматеріал впливають за допомогою реагентів. Ампліфікація (копіювання) нуклеїнових кислот відбувається не хаотично, а згідно з алгоритмом: наприклад, лаборант задає параметри, яким повинні задовольняти паразитарні мікроорганізми.
Поширене призначення ПЛР – виявлення хламідіозу при прояві симптомів або при підозрі на хворобу.
Також лікар може призначити ПЛР, щоб підтверджувати або спростовувати наявність гепатитів B та C, ВІЛ-інфекції, герпесу, кандидозу і інших вірусних і грибкових інфекцій сечостатевої системи.
Важливо відзначити, що виявлення хламідіозу – не єдине призначення процедури. Також її використовують для:
- визначення схильності до деяких патологій;
- визначення ступеня споріднення (найчастіше проводиться тест на батьківство);
- клонування певних генів з необхідними характеристиками;
- виділення раніше відсутніх генів (наприклад, мутованих);
- виявлення причин безпліддя і викидня.
Здавати будь-аналіз, використовує ПЛР в якості основи, можна усім людям в будь-якому віці незалежно від хвороби (у тому числі і вагітним жінкам).
Переваги методу ПЛР
З матеріальної точки зору, ПЛР не дуже вимогливий аналіз, так як на одному і тому ж обладнанні можна проводити багаторазові дослідження. Також він проводиться швидко, що забезпечує пацієнтам невелику вартість і мале очікування. Саме з цієї причини метод ПЛР широко поширений для діагностики хламідіозу та інших досліджень. Статистика говорить про 90% пацієнтів, що направляються на ПЛР при підозрі на хламідіоз.
Крім цього, ПЛР дозволяє знайти патогенний мікроорганізм на початкових етапах хвороби, коли пошкодження органів незначне, а симптоми повністю відсутні. Тому можна говорити про ефективність і достовірність результатів методу.
Потрібно відзначити, що ПЛР – це абсолютно специфічний вид діагностики. Це означає, що в ході дослідження виявляється тільки та макромолекула, яка характерна для збудника хвороби. Як відомо, кожна жива істота має свою ДНК, не збігається ні з якою іншою. По даним «кодом» можна визначити будь-який організм.
Метод ПЛР не має протипоказань і обмежень, тому ним може скористатися будь-яка людина.
Недоліки
Незважаючи на масу позитивних сторін, метод ПЛР має ряд недоліків:
- ПЛР здатна визначити навіть мертві патогенні мікроорганізми, тому перенесена раніше інфекція може спотворити результати дослідження.
- Надчутливість методу – це і перевага, і недолік, який може обернутися неправильним діагнозом в результаті зовнішнього впливу. Недотримання правил під час проведення дослідження (наприклад, непрацюючий повітряний фільтр) спотворить результати.
- Лікар повинен правильно взяти біоматеріал пацієнта, щоб пробу не потрапили сторонні мікроорганізми.
Насправді невірний результат дослідження залежить тільки від кваліфікації і уважності лікарів, а також від дотримання правил збору біоматеріалу. Крім цього, лікар повинен інтерпретувати результати, а при виникненні сумнівів призначати імуноферментний аналіз. Він здатний уточнити стадію, до якої розвинувся хламідіоз.
Підготовка організму до аналізу
Забір біоматеріалу не викликає неприємних відчуттів, так і особливої підготовки не потрібно. Тим не менш слід дотримувати деякі правила, щоб аналіз дав максимально точний результат при діагностуванні хвороби.
Якщо призначений вагінальний мазок на виявлення хламідії, то:
- не можна проводити процедуру при менструації;
- не рекомендується вступати в статеві зв’язки за 20 днів до здачі аналізу;
- з останнього прийому антибіотиків або інших сильних медикаментів (варто уточнити у лікаря) повинен пройти хоча б місяць;
- в день забору біоматеріалу не можна мити статеві органи антибактеріальними засобами;
- використання вагінальних свічок, кремів та інших препаратів місцевого значення негативно позначаються на достовірності аналізу.
Для здачі крові на ПЛР потрібно пам’ятати, що:
- перед парканом біоматеріалу не можна їсти, пити і навіть жувати льодяники;
- за 24 години слід не вживати смажену і жирну їжу, рекомендується провести «розвантажувальний день» або дотримувати легкої дієти;
- медикаменти можуть спотворити результати, тому радять не вживати їх (якщо від них не залежить життєдіяльність організму).
Сеча теж використовується для ПЛР і вона вимагає дотримання наступних правил:
- сеча повинна бути ранкової;
- ємність для збору урини повинна бути стерильною (краще купувати в аптеці);
- необхідно вимити зовнішні статеві органи перед збором біоматеріалу;
- жінкам слід запобігти можливому потраплянню мікроорганізмів з піхви – для цього достатньо закрити вхід в статевий орган з допомогою стерильної вати.
Недотримання правил може призвести до помилковим від’ємним чи позитивним результатом і, як наслідок, неправильним лікуванням або повторними аналізами.
Як відбувається забір матеріалу
Для виявлення хламідіозу у чоловіків береться сперма, мазок з уретри або секрет простати. У жінок необхідний мазок з піхви, уретри або цервікального каналу. В деяких випадках замість мазка жінкам потрібно здавати кров, саме під час менструацій або вагітності.
Кров для ПЛР – дослідження потрібно здавати в лабораторії або процедурному кабінеті. Для обох статей процедура проходить за однаковим алгоритмом: лаборант вводить голку у велику вену на ліктьовому згині і наповнює пробірку.
Якщо є підозри на статеве зараження хламідіозом, то немає сенсу брати мазок – замість нього невелика кількість слизу і тканин соскабливаются з ураженого органу. При трахомі також необхідний зішкріб з кон’юнктиви ока.
Мазок забирається в кабінеті уролога (для чоловіків) або гінеколога (для жінок). Для цього лікар користується спеціальним обладнанням – зондом або ложечкою, при цьому пристосування повинні бути стерильними. Як тільки обладнання введено в сечовипускальний канал, лікар починає обережно повертати його і одночасно отримувати.
Після цього біоматеріал поміщають у пробірки, куди додають реагенти. Далі, пробірки ставлять в спеціальний прилад, і лаборант задає необхідні параметри дослідження. Метод ПЛР – автоматичний, тому результат виходить швидко. В якості підсумку виступає відповідь «позитивний» чи «негативний». На виявлення мікроорганізмів вказує «позитивний» відповідь.
Як правило, при виявленні хламідіозу лікар призначає ІФА – аналіз для визначення фази захворювання.
Розшифровка результатів
Аналіз ПЛР – це якісний, а не кількісний метод. Це означає, що результатом обстеження є не число бактерій в зібраному біоматериалі, а наявність або відсутність патогенних мікроорганізмів.
Протокол аналізу ПЛР повинен містити ПІБ пацієнта, дату проведення дослідження, цільову бактерію і результат. Часто замість словесної розшифровки результату ставиться «+» або «-».
Нормальні показники
У нормі аналіз ПЛР повинен показувати «негативний» результат – відсутність патогенних мікроорганізмів. Але для максимальної достовірності лікар може призначити ІФА аналіз, який дозволяє оперувати кількісними, а не якісними показниками.
Аналіз ІФА має 3 основних показника: IGA, IGG і IGM, і нормою для кожного з них є наступні цифрові характеристики:
- для IGA: до 50;
- для IGG: 100-400;
- для IGM: до 50.
Таким чином, пацієнт може проходити через додаткові процедури для уточнення діагнозу.
ПЛР на хламідії – необхідна процедура при підозрі на хламідіоз. Також ПЛР — дослідження призначається в ряді інших випадків. Перевага методу полягає у високій ефективності і достовірності, але для отримання точного результату необхідно правильно підготуватися до забору біоматеріалу, а лаборант повинен проводити процедуру без відхилення від правил.
