Імуноферментний аналіз крові: що це таке, розшифровка дослідження методом ІФА на паразитів

Розвиток сучасної медицини у світі діагностики не перестає дивувати своїми досягненнями, і тепер лікаря немає потреби висловлювати припущення про ймовірний діагноз, спираючись лише на непрямі ознаки. Створення та введення в світ лабораторних досліджень імуноферментного аналізу крові (ІФА) дозволяє швидко і точно визначити не тільки наявність збудника, але і багато інші характеристики захворювання.

Історія створення і розвитку ІФА

Даний метод дослідження крові став застосовуватися в практичній медицині ще в середині минулого століття – десь у 60-х роках. Початковою метою були наукові дослідження в області гістології, які обмежувалися пошуком і вивченням клітинної антигенної структури біологічних видів. Аналіз крові методом ІФА заснований на взаємодії споріднених антигенів (АГ) і специфічних антитіл (АТ), з формуванням комплексу «антиген-антитіло», що визначається ферментом.

Такий феномен підштовхнула вчених до вирішення, що спосіб можна застосовувати для розпізнавання білкових сполук різних класів, що утворюються в сироватці крові при попаданні в організм збудника. З-за своєї безпосередньої причетності до функціонування імунної системи ці сполуки отримали назву імуноглобуліни (IG, Ig), а відкриття стало найбільшим проривом в лабораторній діагностиці.

При цьому активно використовувати цей високочутливий метод стали лише у 80-х роках, і доступний він був тільки у вузькоспеціалізованих медичних установах. Самими першими отримали можливість користуватися імуноферментними аналізаторами станції та центри переливання крові, венерологічні та інфекційні лікувальні заклади. Це було пов’язано зі стрімким поширенням «чуми XX століття» – Снід, і було потрібно термінове прийняття діагностичних і терапевтичних заходів.

Можливості методики

Область застосування аналізу крові на ІФА досить широка – на даний момент неможливо й уявити, наскільки б ускладнилися пошуки причини багатьох захворювань. Таке дослідження тепер застосовується практично у всіх медичних галузях, навіть в онкології. Хоч для необізнаних це складно зрозуміти, але в окремих випадках провівши його, вдалося врятувати життя пацієнтам, виявивши пухлину на ранніх стадіях.

Важливо! ІФА – аналіз крові, який показує маркери, характерні для деяких злоякісних процесів, що дозволяє виявити захворювання на те часовому етапі, коли ніякому іншому способу це непідвладне.

У сучасних діагностичних центрах, лабораторні обстеження представлені не тільки онкомаркерами – вони забезпечені значним арсеналом панелей для проведення діагностики. З їх допомогою можна визначити безліч патологічних станів, таких як гормональні відхилення та інфекційні процеси різного походження.

Крім цього, проведення і розшифровка аналізу крові ІФА дасть можливість відстежити дію медичних препаратів на організм хворої людини і навіть тварини. Останній широко застосовується у ветеринарних клініках, допомагаючи зберегти здоров’я нашим домашнім улюбленцям або годувальникам, що забезпечує стабільне надходження м’ясної, молочної продукції і незамінних у раціоні яєць.

Читайте також:  Аналіз крові на ЛГ: як правильно здати і розшифровка

Так, в результаті паркану всього декількох мілілітрів венозної крові та її діагностики методикою ІФА, лікар, описавши матеріали дослідження, зможе визначити:

  • гормональний стан, що включає біологічно активні речовини статевих і щитовидної залоз, а також наднирників;
  • наявність бактеріальної і вірусної інфекції (гепатит В і С, сифіліс, герпес, хламідіоз, туберкульоз, міко – та уреаплазмоз, ВІЛ, TORCH) та інші захворювання даної природи;
  • ознаки життєдіяльності збудників патологічного процесу, що завершився одужанням і перейшов у стадію утворення антитіл (імунної відповіді).

Такі комплекси набагато простіше розпізнаються і ліквідуються клітинами імунітету. Залишкові явища у вигляді антитіл у багатьох випадках містяться в крові довічно, що практично зводить ризики повторного зараження до нуля.

Різновиди імуноглобулінів

Існує кілька видів антитіл, причому кожен з них втягується у процес імунної відповіді на певному етапі. Наприклад, першими у відповідь на потрапляння АГ в організм утворюються імуноглобуліни класу М (IgM). Найвищі показники спостерігаються у перші дні захворювання.



Види використовуваних при ІФА імуноглобулінів

Потім імунна система запускає в плазму ІГ класу G (IgG), відповідальні за повне знищення антигенів і одужання хворого. Пізніше вони так і продовжують перебувати в крові, тим самим готуючи імунітет до повторного потрапляння ідентичного збудника. За таким принципом працює вакцинація. При введенні ослаблених антигенів патологічних мікроорганізмів, у плазмі з’являється і залишається циркулювати багато імуноглобулінів.

Та, згодом, якщо відбувається патогенний контакт, вони швидко справляються з інфекцією, уберігаючи організм від загрози здоров’ю. ІдА у великій кількості зосереджені в слизових оболонках, перегороджуючи попаданню всередину організму хвороботворних вірусів і бактерій. ІдЕ відповідальні за знищення паразитарних інфекцій, а також існує безліч інших імуноглобулінів, що беруть участь у відповіді імунітету.

Основними важливими об’єктами для лабораторної діагностики вважаються Ig класів M, G, A. За рівнем їх концентрації можна визначити стадію захворювання і дізнатися, якими інфекційними хворобами людина хворів у своєму житті. Наприклад, можна перевірити була в анамнезі вітряна віспа або краснуха. Лікаря, щоб дізнатися присутній певний вид АТ чи АГ в організмі пацієнта або концентрацію будь-якого гормону, немає необхідності призначати множинні лабораторні обстеження – досить виписати направлення на ІФА.

Суть методики

Імуноферментний аналіз крові на паразитів та інших мікроорганізмів – шкідників здоров’ю організму дає можливість не тільки встановити наявність збудників, але і розповість про їх чисельності в плазмі крові пацієнта. Таким чином, подібне дослідження дозволяє зробити і якісний і кількісний аналіз патогенних мікроорганізмів, виявлених у сироватковому матеріалі.

Рівень концентрації збудника в значній мірі впливає на розвиток інфекції і швидкість одужання, тому якісна оцінка вважається не менш важливою, ніж кількісна. Їй відводиться далеко не остання роль як при лікуванні дітей, так і дорослих. Але як же виходить, що ІФА вдається розпізнавати такий широкий діапазон мікроорганізмів, які паразитують у тілі людини і тварин, приносячи шкоду і знижуючи якість життя?

Читайте також:  MCHC в аналізі крові: що це таке, розшифровка, норма у жінок, причини зниження

Методика дослідження будується на кількох варіантах (прямий і непрямий – конкурентний і неконкурентний) виконання поставлених завдань, причому кожен з них призначений для певних цілей. Такий підхід дозволяє проводити цілеспрямований пошук, і в найкоротші терміни виявляти причину тієї чи іншої патології. Для виявлення Ig різних класових категорій застосовується 96-лунковий планшет (полістирол панель), а в його лунках розташовані сорбованих рекомбінантні білки. Вони виконують роль антигенів, і на початковому етапі знаходяться в твердій фазі.

При попаданні в лунку з плазмою крові, антигени або антитіла ідентифікують у зв’язку зі своєю спрямованістю на об’єкт, і формують комплекс АГ – АТ). Дане утворення закріплюється ферментним сполукою (коньюгатом), який згодом проявиться зміненим фарбуванням лунки. ІФА проводиться на специфічних тест-системах, виготовлених в профільних лабораторіях і укомплектованих повним набором реагентів.

Даний аналіз можна виконувати на вошерах – промивних апаратах і зчитувальних спектрофометров, але вони вимагають ручної праці. Безумовно, лаборанту в кілька разів зручніше і швидше здійснювати всі маніпуляції на повністю автоматизованих приладах. При їх використанні співробітники лабораторії звільняються від великого обсягу монотонної діяльності – промивання, закапування і решті рутини, але не всі лікувальні установи можуть собі дозволити таку дорогу апаратуру

Тому багато лікарень і діагностичні заклади продовжують здійснювати ІФА по-старому – на напівавтоматах.

Інтерпретація матеріалів дослідження виключно компетенція фахівця лабораторної діагностики – тільки йому можуть розповісти результати про специфіку та нюанси перебігу захворювання. При цьому лікар повинен обов’язково врахувати можливість отримання хибно-негативних або хибно-позитивних відповідей.

Розшифровка матеріалів

Підсумком якісної імуноферментної діагностики має стати однозначний висновок – знайдений шуканий мікроорганізм чи ні в даному зразку крові. Кількісний аналіз буде вказувати на рівень концентрації і може виражатися двома способами – значенням в цифрах або кількістю знаків «+».

Аналізовані показники

У процесі дослідження проводиться ретельне вивчення основних імуноглобулінів, залучених в імунну відповідь, таких як:

  • IgM – виявлення даного класу означає розвиток гострої форми інфекційного захворювання. Негативний результат пошуку IgM може бути як свідченням відсутності шуканого збудника, так і переходу хвороби в хронічну течію.
  • ІдА – визначення цього класу при відсутності IgM у більшості випадків сигнал про хронічну або прихованій формі розвитку інфекційної хвороби.
  • IgM та ІдА (одночасне наявність) – позитивні результати на обидва виду свідчить про самому піку гострої форми патології.
  • IgG – його наявність вказує на трансформацію захворювання в хронічну форму або на одужання і формування імунітету до означуваного агенту.
Читайте також:  Аналіз крові на серотонін і розшифровка його результатів

Поява і накопичення певного класу ІГ відбувається на різних тимчасових етапах. Так, наприклад, першими з’являються IgM, приблизно на 5 день від потрапляння збудника. ІГ знаходяться в крові близько 5-6 тижнів, і потім поступово зникають. В цей час вони доступні до визначення допомогою ІФА. Орієнтовно через 3-4 тижні від початку хвороби з’являються IgG, які згодом можуть залишатися протягом декількох місяців. Але в аналізі їх не завжди вдається виявити.

ІдА утворюються в крові в період 2-4 тижні, при цьому 20% їх міститься в сироватці, а 80% – у секреті слизових оболонок. Як правило, ці імуноглобуліни зникають протягом 2-9 тижнів, що свідчить про знищення збудника і одужання хворого. Якщо ж ІФА все ж показує наявність ІдА, то це сигналізує про перехід процесу в хронічну форму.

Варіанти результатів аналізу

В залежності від отриманих даних, відповіді ІФА можуть бути видані на бланку у вигляді таблиці з повним списком всіх АТ та АГ та зазначенням позитивної або негативної реакції. У певних ситуаціях буде виведене кількісне значення – різко позитивний, позитивний, слабоположительный або негативний результат. Другий варіант вказує на кількість АТ в досліджуваному зразку крові.



Варіанти інтерпретації матеріалів ІФА

Крім перерахованих значень, в процесі ІФА досліджується ще один кількісний параметр – індекс авідності АТ, що вимірюється у відсотках. Він показує, скільки триває захворювання – тобто чим вище показник, тим більше часу йде розвиток патології.

Альтернативний спосіб ІФА

Імуноферментний аналіз крові – досить відома і поширена діагностика. Можливо, про неї ніколи і не чули деякі, але існує одна ще менш відома широкому колу людей різновид даного дослідження, при якому береться зразок не крові. Ця методика називається аналіз калу на приховану кров, і в багатьох випадках вона дозволяє уникнути додаткових виснажливих процедур, до того ж ще супроводжуються неприємними відчуттями.

Аналіз ІФА на приховану кров (молекули гемоглобіну) дає можливість виявити кровотечу органів травної системи, навіть незначне, ознаки якого в калі хворого, як мовиться, неозброєним оком не знайти. Імуноферментний аналіз прихованої крові у випорожненнях людини за короткий час здатний показати виразкову хворобу, поліпоз, дивертикулез, пухлини, які на ранніх стадіях не супроводжуються певною симптоматикою.

На сьогоднішній день створені тисячі різновидів тест-систем імуноферментної діагностики, які надають можливість знаходити АТ та АГ величезного списку патологій. Тому даний аналіз застосовується майже в усіх галузях медицини, яка для будь-якої вікової категорії. А абсолютна нешкідливість дозволяє вдаватися до нього і при вагітності, і для діагностики ослаблених пацієнтів.

Відео по темі: