Что такое ГМО и как его определяют?

Генетически модифицированными наука считает все организмы, генетический материал которых был изменен методами генной инженерии. Единого определения ГМО и генной инженерии не существует, важно, что такие организмы изменяются без естественного спаривания и/или рекомбинации. В них могут вводиться новые гены, а эндогенные элементы могут усиливаться, изменяться или удаляться. Эти гены могут передаваться внутри одного вида, между видами (трансгенные организмы) и между животными царствами.

Что такое ГМО и как его определяют?

Технология

Создание генетически модифицированного организма представляет собой многоступенчатый процесс. Прежде всего требуется изолировать ген, предназначенный для доставки в организм хозяина, затем объединить его с другими генетическими элементами, в частности, промотор и терминаторную область, а также селективный маркер. Существует две группы методов обнаружения ГМО. Первая основана на анализе ДНК, вторая и использует для анализа белки. Методы идентификации, основанные на лабораторном анализе ДНК, являются значительно распространенными, по сравнению с методами идентификации белков в ГМ-организмах.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Идентификация ГМО на основе ПЦР предполагает идентификацию конкретных генов путем выявления трансгенных событий и последовательностей промотора и терминатора. Широкое распространение получили наборы для проведения мультиплексных количественных ПЦР-исследований для определения ГМ-культур в единой реакционной смеси. Проверку на ГМО данным методом можно заказать, к примеру, на сайте https://biocor-tech.com/ru/

Цифровая ПЦР (цПЦР)

Использование цифровой ПЦР представляет собой один из самых надежных методов из ныне существующих методов количественной оценки ГМО. В ходе исследования пробу помещают в сосуд с большим количеством изолированных микролунок-реакторов. После термоциклирования производится детекция флуоресцентного сигнала с помощью специального цифрового спектрофотометра (ридера).

Капиллярный гель-электрофорез

Перспективный девятикомпонентный ПЦР-метод обнаружения ГМО предложили ученые из Норвежского НИИ пищевых исследований. Они ПЦР проводят с праймерами, меченными флуоресцентными красителями. При этом ампликоны разделяют по длине и окраске с помощью капиллярного электрофореза в геле (КГЭ). Предел обнаружения составил до 0,1% для каждого вида ГМО. Метод подходит для скрининга пищевых продуктов и кормов, содержащих наиболее распространенные ГМО.

Петлевая изотермическая амплификация

Петлевая изотермическая амплификация (ПИА) представляет собой относительно новую технологиею, которая была применена для выявления переноса чужеродных генов. ПИА предполагает использование четырех различных праймеров, которые идентифицируют по меньшей мере шесть различных сегментов нужной ДНК. Продукт изотермической амплификации идентифицируют по «лестничному» рисунку распределения ДНК после электрофореза в агарозном геле, либо наблюдают за реакцией в реальном времени с помощью турбидиметрии.

Читайте також:  Правильное пользование шампунем от перхоти

Микрочиповая технология

При использовании микрочипа (ДНК-чипа) происходит параллельное обнаружение большого числа генетических элементов из сложных образцов ДНК в одном анализе. Множество специально разработанных зондов к ГМО и зонды, дублирующие последовательность ДНК в пробе, размещаются на твердой поверхности в виде точек в рядах, пересекающихся под прямым углом. Выделенную из пробы ДНК гибридизуют с массивом зондов и метят флуоресцентным красителем. На стадии гибридизации отмеченный сегмент ДНК остается связанным с зондами по принципу комплементарности. Чем больше длина комплементарных последовательностей ДНК, тем более прочной будет связь. После гибридизации последовательности, не связавшиеся с зондами, удаляются, и измеряется интенсивность флуоресценции каждой точки поверхности с иммобилизованными комплексами ДНК-зондов.

Секвенирование следующего поколения

Секвенирование следующего поколения (ССП) позволяет проводить параллельную массовую расшифровку последовательности участка ДНК. Это эффективный инструмент для выявления трансгенных организмов при отсутствии какой-либо информации о чужеродных генах в ГМ-организме, определения места вставки гена, участков ДНК пограничных с геном и количества копий вставленного гена.

diagnoz.in.ua